نوع مقاله : مقاله پژوهشی
نویسندگان
1 گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسالمی، شهرکرد، ایران
2 مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران
چکیده
مقدمه: پروبیوتیک ها میکرو ارگانیسم های زنده ای هستند که مصرف کافی آن ها سبب نمایان شدن اثرات سلامت بخش در بدن میزبان می شود. هدف از این پژوهش بررسی اثرات باکتری پروبیوتیک لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس بیان کننده پپتید Tachyplesin I خرچنگ نعل اسبی بر رشد سودوموناس آئروژینوزا بود.
روش کار: پلاسمید نوترکیب pNZ8148-Tachyplesin I حاوی ژن Tachyplesin I به روش شوک حرارتی وارد باکتری E.coli شده و سپس تخلیص شد. وکتور نوترکیب حاوی ژن Tachyplesin I به روش الکتروپوریشن وارد باکتری لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس شد و غربالگری با آنتی بیوتیک کلرامفنیکل و PCR انجام گرفت. سپس تاثیر مهاری باکتری لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس مهندسی شده روی رشد سودوموناس آئروژینوزا بررسی و با دیسک های آنتی بیوتیکی مقایسه شد.
یافته ها: ورود پلاسمید pNZ8148-Tachyplesin I درون باکتری لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس با کلرامفنیکل و توسط واکنش PCR تایید شد. مشخص شد که باکتری مهندسی شده اثر مهاری روی رشد باکتری بیماری زای سودوموناس آئروژینوزا دارد، به صورتی که قطر هاله عدم رشد ایجاد شده روی سودوموناس آئروژینوزا تحت تاثیر لاکتوباسیلوس مهندسی شده قابل قبول بود. پس از مقایسه قطر هاله های دیسک های آنتی بیوتیکی آمپی سیلین و کلرامفنیکل با لاکتوباسیلوس مهندسی شده تفاوت معناداری در هاله عدم رشد مشاهده نشد
(p-valu>0.05)، اما قطر هاله حاصل از تتراسایکلین با هاله حاصل از لاکتوباسیل مهندسی شده دارای تفاوت آماری معناداری بود.
نتیجه گیری: با توجه به این که حضور ژن Tachyplesin I درون لاکتوباسیلوس اسیدوفیلوس تایید شد، هاله عدم رشد حاصل از آن در اطراف سودوموناس آئروژینوزا نشان دهنده این است که بیان و ترشح ژن Tachyplesin I لاکتوباسیلوس اثری مشابه آنتی بیوتیک بر سودوموناس آئروژینوزا دارد.
کلیدواژهها
عنوان مقاله [English]
Investigation of the inhibitory effect of Lactobacillus acidophilus engineered probiotic expressing Tachyplesin I horseshoe peptide on the growth of Pseudomonas aeruginosa
نویسندگان [English]
1 Department of Biology, Faculty of Basic Sciences, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran
2 Biotechnology Research Center, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran
چکیده [English]
Introduction: Probiotics are living micro-organisms whose sufficient consumption causes health-giving effects to appear in the host's body. The purpose of this research is to produce the effects of Lactobacillus acidophilus probiotic bacteria expressing horseshoe crab Tachyplesin I on the growth of Pseudomonas aeruginosa.
Materials and Methods: Plasmid pNZ8148-Tachyplesin I containing Tachyplesin I gene was introduced into E.coli by heat shock method. The recombinant vector was introduced into Lactobacillus acidophilus bacteria by electroporation and screening was done by chloramphenicol antibiotic and PCR. Then, the inhibitory effect of the engineered Lactobacillus acidophilus bacteria on the growth of Pseudomonas aeruginosa was investigated and compared with antibiotic discs.
Results: Plasmid pNZ8148-Tachyplesin I entry into Lactobacillus acidophilus was confirmed by chloramphenicol and PCR. Then it was determined that the engineered bacteria had an inhibitory effect on the growth of the pathogenic bacterium Pseudomonas aeruginosa, so that the diameter of the halo of non-growth created on Pseudomonas aeruginosa under the influence of the engineered Lactobacillus was acceptable. After comparing the halo diameters of ampicillin and chloramphenicol antibiotic discs with engineered Lactobacillus and conducting statistical analysis, no significant difference was reported in the non-growth halo (pvalue>0.05), but the halo diameter of tetracycline with The aura obtained from the engineered lactobacillus had a statistically significant difference.
Conclusion: The presence of Tachyplesin I gene in Lactobacillus acidophilus was confirmed, the halo of lack of growth around Pseudomonas aeruginosa indicates that the expression and secretion of Lactobacillus Tachyplesin I gene has an antibiotic-like effect on Pseudomonas aeruginosa.
کلیدواژهها [English]