نویسندگان

• علیرضا خیرالله ¹
• مصطفی چشم پوش ²
• اسما محمدی ²
• ندا عبدویسی ²
• حمیده قاسم پور ²

¹ گروه بیوشیمی بالینی، مرکز تحقیقات سلولی و ملکولی ، دانشکده پزشکی ، دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز، ایران

² ، دانشکده پزشکی ، دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز، ایران

چکیده

چکیده :

مقدمه

کشت سلولی یکی از تکنیک های اصلی مورد استفاده در تحقیقات علمی امروز می باشد که به سه صورت انجام می شود: کشت اولیه، کشت ثانویه یا پاساژ سلولی و خریدن سلول های نامیرا از بانک های سلولی. سلول فیبروبلاست یکی از اجزای مهم بافت همبند می باشد که تقریبا در همه جای بدن یافت می شود. سلول های فیبروبلاست بر اساس موقعیت قرارگیری، نقش های عملکردی و مورفولوژی گوناگونی را دارا می باشند. هدف ما در این طرح ساده سازی از طریق نوآوری و بومی‌سازی، و به دست آوردن سلول های فیبروبلاست  پوستی نوزاد موش به منظوراستفاده از این سلول ها برای مطالعات بعدی بود.

مواد و روش ها

برای انجام این پروژه از نوزاد موش یک تا دو روزه از نژاد سوری استفاده شد. قبل از شروع کار ابتدا تمام وسایل ازجمله ست جراحی و ظروف کشت و بافرها و ... توسط اتوکلاو در دمای 121 درجه سانتیگراد و فشارشدید استریل شدند، همچنین محیط کار توسط الکل 70% و لامپ UV استریل شدند. ابتدا نوزادهای موش زیر هود بیولوژی و با ابزار استریل در الکل 70 درصد کشته واستریل شدند و سپس سلول های فیبروبلاست پوستی از این موش ها جدا شد. علاوه بر این سلول های فیبروبلاست پوستی کشت داه شده جهت رشد بیشتر از محیط اولیه به یک محیط تازه و جدید منتقل شدند و اولین پاساژ سلولی بر روی این سلول ها انجام شد.

نتایج

سلول های فیبروبلاست کشت داده شده در روزهای مختلف از لحاظ میزان رشد و مورفولوژی توسط میکروسکوپ فلوئورسنت (Olympus) با بزرگنمایی 10 مورد بررسی قرار گرفتند، که این سلول ها از نظر مورفولوژی مناسب بودند.

نتیجه گیری

با توجه به نتایج مطالعه حاضر، سادگی این روش، عدم نیاز به صرف هزینه زیاد و استریل بودن شرایط بدون استفاده از آنتی بیوتیک و ضد قارچ ،استفاده از این روش برای جداسازی و کشت سلول ها در مطالعات مختلف را منطقی می سازد.



واژگان کلیدی : کشت سلولی، سلول های فیبروبلاست، نوازاد موش

کلیدواژه‌ها

• کشت سلولی
• سلول های فیبروبلاست
• نوازاد موش

عنوان مقاله [English]

Isolation and culture of mouse newborn skin fibroblast cells in a simple and inexpensive method

نویسندگان [English]

• Alireza Kheirollah ¹
• Mostafa Chashmpoosh ²
• Asma Mohammadi ²
• Neda Abdovis ²
• Hamide Ghasempoor ²

¹

²

چکیده [English]

Background  and  objective

Cell culture is one of the main techniques used in scientific researches that done in three ways: Primary culture, secondary culture or cell passage and purchase Cell Lines of Cell banks. Fibroblast cell is an important component of connective tissue that is found almost everywhere in the body. Fibroblast cells based on their location have functional and morphology roles. The aim of this project was simplification through innovation and localization, and to obtain mouse newborn skin fibroblast cells in order to use these cells for further study.

Methods

For this project were used from mouse neonatal that is one to two days. Initially all devices, including surgical materials, culture dishes, buffer and etc were sterilized by autoclaving at 121 ° C and intense pressure. As well as workplace were sterilized by 70% alcohol and UV. Initially mouse neonatal under the biology hood and in 70% alcohol were killed and were sterilized with sterile instruments and then skin fibroblast cells were isolated from these mice. In addition skin fibroblast cells for further growth were transferred of the primary environment to a fresh and new medium and first passages was performed on these cells.

Results

Fibroblast cells in different days were evaluated in terms of growth and morphology by fluorescent microscope (Olympus) with a magnification of 10, that this cells in terms of morphology were appropriate.

Conclusion

According to the results of this study, the simplicity of this method, no need to high costs and sterile conditions without the use of antibiotics and anti-fungal, makes reasonable use of this method for isolation and cell culture in different studies.



Keywords: Cell culture, Fibroblast cells, Mouse newborn

کلیدواژه‌ها [English]

• Cell culture
• Fibroblast Cells
• Mouse newborn