بررسی اپیدمیولوژی مولکولی لیشمانیوز پوستی در بیماران مراجعه کننده به گروه انگل شناسی دانشکده پزشکی شیراز و اهمیت کاربرد روش PCR در تشخیص بیماری

نویسندگان

وزارت بهداشت درمان وآموزش پزشکی

چکیده

مقدمه: استان فارس یکی از کانون های آندمیک لیشمانیوز پوستی محسوب می شود. هدف از مطالعه حاضر بررسی وضعیت اپیدمیولوژی مولکولی و ارزیابی روش مولکولی واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) بر روی اسلایدها برای تشخیص بیماری در بیماران مراجعه کننده به گروه انگل شناسی دانشکده پزشکی شیراز بود.

روش کار:

 این مطالعه مقطعی در یک دوره زمانی 5 ساله (84-80) روی بیماران مراجعه کننده به گروه انگل شناسی دانشکده پزشکی انجام شد. تشخیص بیماری با تهیه اسمیر مستقیم از ضایعات و رنگ آمیزی گیمسا بود. در موارد ضروری در صورت منفی شدن نتیجه آزمایش با روش مستقیم، از روش واکنش زنجیره ای پلیمراز بر روی اسمیر مستقیم جهت تعیین جنس لیشمانیا و گونه انگل استفاده شد. داده های بدست آمده ثبت شدند و توسط نرم افزار SPSS  مورد تجزیه و تحلیل آماری قرار گرفتند .

یافته ها:

 در این مطالعه تعداد 186 بیمار مشکوک به لیشمانیوز پوستی مورد مطالعه قرار گرفتند که  نتیجه آزمایش مستقیم 104 نفر(56 درصد) مثبت  شد.  همچنین با استفاده از روش  واکنش زنجیره ای پلیمراز، روی تعداد  62 گسترش مستقیم که جسم لیشمن در آن ها  مشاهده نشده بود، در 35 مورد (4/56 درصد) از آن ها دی ان ای (DNA) انگل لیشمانیا شناسایی شد. همچنین با استفاده از پرایمرهای اختصاصی گونه، گونه انگل لیشمانیا در بیماران ساکن نقاط مرکزی شهر، گونه ی لیشمانیا تروپیکا (نوع شهری) و در بیماران ساکن روستاهای حومه، گونه ی لیشمانیا ماژور (نوع روستایی) بود.

 بحث و نتیجه گیری:

 از آن جایی که در بعضی از موارد گزارش اسمیر مستقیم بیماران منفی است، لذا پیشنهاد می شود در مناطق آندمیک در صورت مشکوک بودن به بیماری از روش  واکنش زنجیره ای پلیمراز بر روی نمونه ها  استفاده شود.

کلیدواژه‌ها

عنوان مقاله [English]

A molecular epidemiology survey of cutaneous leishmaniasis in patients referring to Parasitology Lab at Shiraz School of Medicine and the importance of PCR assay

نویسندگان [English]

  • Mehdi Fakhar
  • Fataneh Mikaeili
  • GR Hatam
  • Parvaneh Habibi
  • Mehdi Karamian
  • MohammadHosain Motazedian
  • Elham Banimostafavi

چکیده [English]

Introduction:

 Fars Province is one of endemic foci of cutaneous leishmaniasis (CL). The present study aimed to conduct a molecular epidemiology survey of patients referring to Parasitology Lab at Shiraz School of Medicine and evaluate the  PCR assay for the diagnosis of CL.

Material and Methods:

This retrospective study was carried out for patients referring to Parasitology department at Shiraz School of Medicine, during 1380-84. The disease was diagnosed by direct smear and staining with Giemsa; if the direct smear was negative, specific PCR was done on the DNA extracted from the direct smear to genus and species identification and culture. The data were registered and analyzed by SPSS software.

Results:

Of 186 suspected patients, 104 (56%) cases were infected with CL. PCR results were positive in 35 (56.4 %) out of 62 smears, among which microscopic examination did not reveal Leishmania amastigotes. Also, Leishmania species isolated from the patients residing in the urban and rural areas were Leishmania tropica and Leishmania major by species-specific primers, respectively.

Conclusion:

Since in some cases the direct smear is reported negative, we suggest using PCR methods on smears in endemic regions.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Cutaneous leishmaniasis
  • Molecular Epidemiology
  • Demographic
  • Leishmania major
  • Leishmania tropica