نوع مقاله : مقاله پژوهشی

نویسندگان

• مریم احمدی ¹
• جاوید صدرایی ²
• عبدالحسین دلیمی ¹
• مجید پیرستانی ¹

¹ گروه انگل شناسی و حشره شناسی- دانشکده علوم پزشکی- دانشگاه تربیت مدرس- تهران- ایران

² گروه انگل شناسی و حشره شناسی، دانشکده پزشکی دانشگاه تربیت مدرس ایران تهران

چکیده

مقدمه: ال-آرژنین به عنوان یک سوبسترا سبب تحریک آنزیم اکسید نیتریک سنتاز القاکننده (iNOS) شده که خود باعث سنتز اکسید نیتریک در سلول های اپیتلیال روده و حذف انگل روده ای تک سلولی مشترک بین انسان و حیوان به نام بلاستوسیستیس می شود. مطالعه حاضر با هدف ارزیابی تاثیر ال-آرژنین بر زیر گروه 3 بلاستوسیستیس در شرایط آزمایشگاهی انجام شد.
روش کار: انگل در محیط کشت DMEM-F12 فاقد آرژنین کشت داده شد و سپس زیر گروه آن با واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR)، زیر گروه 3 شناسایی شد. آزمایش های MTT و فلوسایتومتری به ترتیب برای سنجش میزان سمیت و مرگ سلولی در سلول های Caco2 پس از مواجهه با ال-آرژنین و مترونیدازول انجام شد. تاثیر غلظت های   0.8 ، 0.4 ، 0.2 ، 0.1و 1.6 میلی مول ماده ال-آرژنین و غلظت های 1، 2، 4،  8و 16 میکروگرم بر میلی لیتر داروی مترونیدازول بر تروفوزوئیت های بلاستوسیستیس در دو دوره 24 و 48 ساعتی بررسی شد. در نهایت تعداد سلول های زنده با رنگ آمیزی تریپان بلو و به وسیله لام نئوبار شمارش و غلظت IC50 دارو و ماده مورد نظر مشخص شد.
یافته ها: بعد از 48 ساعت، تعداد تروفوزوئیت های زنده بلاستوسیستیس با افزایش غلظت ال-آرژنین به طور چشمگیری کاهش یافت. همچنین میزان تروفوزوئیت های زنده در غلظت 1.6 میلی مول 33.83 درصد تعیین شد (p<0.05).
نتیجه گیری: ال-آرژنین در غلظت های بالا قادر به مهار رشد تروفوزوئیت های بلاستوسیستیس در شرایط آزمایشگاهی است.

کلیدواژه‌ها

• بلاستوسیستیس
• آرژنین
• فلوسایتومتری
• شرایط آزمایشگاهی

عنوان مقاله [English]

Investigating the Effect of L-arginine on Blastocystis SubType 3 In Vitro

نویسندگان [English]

• Maryam Ahmadi ¹
• Javid Sadraei, ²
• Abdolhossein Dalimi ¹
• Majid Pirestani ¹

¹ Department of Parasitology and Entomology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran

² Department of Parasitology and Entomology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran

چکیده [English]

Introduction: Blastocystis is an extracellular and noninvasive unicellular enteric parasite with zoonotic potential.
Intestinal epithelial cells produce nitric oxide (NO), primarily on the apical side, in order to target luminal pathogens. L-arginine acts as a substrate for inducible nitric oxide synthesis (iNOS), which leads to the synthesis of nitric oxide. The current study was designed to assess the effect of L-arginine on Blastocystis ST3 in vitro conditions.
Materials and Methods: The parasite was cultivated in DMEM F-12`s medium and was then identified by polymerase chain reaction (PCR) and the subtype of the parasite was determined which was subtype 3. Then, the methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) and flow cytometry methods were used to evaluate the cytotoxicity and probable apoptosis of the prepared drugs /substances on CaCO2 cells. This study investigated the concentrations of L-arginine ( 0.1, 0.2, 0.4, 0.8 and 1.6 mM ) and Metronidazole (1, 2, 4, 8 and 16 μg/ml), and their effect on 24 and 48 hour time points after exposure to the parasite. Then, the final number of parasites was counted after staining with trypan blue by a Neubauer slide and the values of IC50 were calculated for each substance.
Results: It was found that after 48 hours the number of live Blastocystis trophozoites decreases with the increase in L-arginine concentration and At the concentration of 1.6 mM the number of live trophozoites was 33.83 (P< 0.05).
Conclusion: L-arginine, in high concentrations‚ is capable of inhibiting Blastocystis trophozoites In vitro.

کلیدواژه‌ها [English]

• Blastocystis
• L-arginine
• Flow cytometry
• In vitro