:: دوره 19، شماره 1 - ( بهار 1400 ) ::
جلد 19 شماره 1 صفحات 10-20 برگشت به فهرست نسخه ها
اثرحذف ژن موثر در بروز سرطان UCA1 با تکنیک نوین ویرایش ژنی CRISPR/Cas9 در رده سلولی سرطان تخمدان
بهشاد منتظری نجف آبادی ، عباس دوستی* ، جعفر کیانی
مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران
چکیده:   (729 مشاهده)
مقدمه: lncRNAها در رشد سلول، رونویسی، ترجمه و آپوپتوز نقش دارند. UCA1 نوعی lncRNA مهم است که با پیشرفت سرطان تخمدان ارتباط دارد. بیش از نیمی از زنان مبتلا به سرطان تخمدان در کمتر از پنج سال بعد از تشخیص، از بین می روند. هدف از این تحقیق حذف ژن UCA1 با استفاده از تکنیک پیشرفته CRISPR /Cas9 در سلول SK-OV-3 و تعیین اثر آن بر پیشرفت سرطان و آپوپتوز است. 
روش­ کار: ابتدا با نرم افزار CHOPCHOP، دو نوع sgRNA‌ برای UCA1 طراحی گردید. این sgRNA‌ها پس از سنتز، در دو وکتور pSCas9 به صورت جداگانه کلون شدند. سلول­های SK-OV-3، با دو وکتور حامل sgRNA‌ها، ترانسفکت شدند. پس از تایید عملکرد صحیح CRISPR در این سلول­ها، بیان ژن­های P53 ، BAK, BAX و FAS  و آنتی‌آپوپتوزی BCL2 و survivin به روش real time PCR ارزیابی گردید. همچنین میزان تکثیر سلولی و آپوپتوز با MTT و فلوسیتومتری بررسی شد.
یافته ها: نتایج نشان دهنده حذف موفق ژن UCA1 در رده سلولی SK-OV-3 بود. بیان ژن­های P53، BAK, BAX و FAS در سلول­های دستورزی شده نسبت به سلول­های شاهد، به صورت معنی داری افزایش بیان نشان داد (05/0>p). همچنین، کاهش بیان ژن­های BCL2 و survivin در سلول­های دچار حذف ژن نسبت به گروه شاهد، دیده شد (05/0>p). نتایج MTT و فلوسیتومتری موید کاهش تکثیر سلولی و افزایش آپوپتوز بود. 
نتیجه­گیری: حذف ژن UCA1 در سلول SK-OV-3، اثرات مثبت در کاهش تکثیر و افزایش آپوپتوز نشان داد، لذا جلوگیری از بیان ژن UCA1، نقش موثر در کنترل رشد سلول­های سرطان تخمدان دارد.
واژه‌های کلیدی: UCA1، سرطان تخمدان، CRISPR/Cas9
متن کامل [PDF 960 kb]   (200 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: دارو سازی
دریافت: 1400/1/6 | ویرایش نهایی: 1400/2/27 | پذیرش: 1400/2/15

Research code: 1398/8
Ethics code: IR.IAU.SHK.REC.1399.017



XML   English Abstract   Print



بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.
دوره 19، شماره 1 - ( بهار 1400 ) برگشت به فهرست نسخه ها